微生物（大肠杆菌）专题报告

文献：大肠杆菌 微生物 文献 专题报告 大肠杆菌病原微 生物 大肠杆菌的画法 大肠杆菌

摘要：禽大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起各种禽类的一种急性或慢性传染病，主要侵害鸡、鸭、鹅，以及各类珍、特禽， 临床上有多种表现形式，其中以急性败血型、卵黄性腹膜炎和生 殖器官损害较常见，危害性也最为严重。本文主要在病原学、流 行病学、临床症状、病理变化和诊断与防治等方面对禽大肠杆菌 病进行了综述。 引起禽类的一种急性、慢性传染病的总称。其病型和病变复杂多样。本菌抗原结构复杂，血清型多，变异菌株不断出现，分布极 广，不同地区有不同血清型，同一地区不同养殖场甚至同一养殖 场同一种群也可能有多个血清型。本病的普遍性，给养禽业造成 严重威胁和重大经济损失[1,2]。 禽大肠杆菌病常继发于其他致病因子或与其他致病因子一同作用，使其表现得复杂多变，往往使真正的罪魁祸首得以掩盖。禽 大肠杆菌病发病频繁，容易反复发作，加上用药较乱，病原菌血 清型多、抗原结构复杂，极易产生耐药性，使其防不胜防。1976 Smits等发现新城疫疫苗、传染性支气管炎疫苗免疫，支原体 感染与大肠杆菌感染之间的关系，气雾免疫法及支原体感染大幅 提高大肠杆菌感染率[3]。 大肠杆菌是人和动物肠道中的常见菌，多为条件性致病菌，当机体健康，抵抗力强时，这些菌株不表现致病性，当机体健康状 况下降，特别是在应激情况下，其致病性增强，引起发病。致病 性大肠杆菌在自然界中广泛存在，凡有哺乳动物和禽类活动的环 境空气、水源和土壤中均有本菌存在。当禽舍通风不良、饲养密 度大、卫生条件差、饲料质量不好、禽舍污染严重时，该病传播 途径可经过消化道、呼吸道、交配等途径水平传播，还可通过其 它多种途径，使种蛋被污染而进行垂直传播[1]。 禽大肠杆菌病病原是革兰氏阴性、非抗酸性、染色均一，不形成芽孢，两端钝圆的短杆菌，需氧或兼性厌氧。有时大小和形态 可能是多变的，许多菌株有运动性，有周身 鞭毛，通常不可见荚膜。本菌对外界的抵抗力不强，一般60 15min 便可杀死，对一般消毒剂的抵抗力也很弱。 本病一年四季均可发生，但在多雨、闷热、潮湿季节多发。禽舍通风不良、卫生条件差、饲养密度过大、青饲料不足和维生素 因饲养管理水平、环境卫生条件、防治措施、有无继发其他疾病等因素影响，本病的发病率和死亡率有较大差异。 1．传染源：病禽和带菌者是本病的主要传染源，通过粪便排出病菌，散布于外界，污染水、料以及皮肤。 消化道、呼吸道、经蛋传染、交配、经蛋传播等途径均可感染本病，但不同禽场、不同病型传染途径不同。呼吸道传染主要由 于带有大肠杆菌的尘埃被易感禽吸入，进入下呼吸道后侵入血液 而引起；消化道传染是通过被致病性大肠杆菌污染的饲料和饮水 而发生，尤以水源污染引起发病最为常见；经蛋传染主要是种蛋 产出后被粪便污染，细菌很容易经蛋壳和壳膜侵入；患有大肠杆 菌性输卵管炎及生殖器官疾病和产蛋母禽在蛋形成过程中本菌可 进入蛋内经蛋传播；患大肠杆菌的公禽可通过与易感禽只交配， 经泄殖腔传播本病[4]。 代写  消化道：饲料和饮水被大肠杆菌污染，特别在老养殖区，棚舍密集，粪便乱堆放，人员及车辆（送料车、收粪车等）无法严格 消毒，其中以水源污染引发的病症最为常见，表现为用药即好停 药复发；初生雏用凉开水就好，用生水就发病。 呼吸道：污染严重禽舍，大肠杆菌吸附在尘埃上漂浮于空气中，被易感鸡只吸入，通过呼吸道感染发病。此类情况多发于鸡舍湿 度长期严重偏低、带鸡消毒次数少、通风不良的鸡场。 蛋壳：种蛋产出后被粪便或环境污染，没有及时清洗、消毒，造成种蛋带菌。 交配：病菌可通过不洁精液把病传给母鸡，造成 母鸡感染和垂直传播。 经蛋传播：患病或亚健康种母鸡在蛋的形成过程中，可经蛋垂直传播本病，引起孵化率降低和形成弱雏，造成早期发病。国内 调查发现，死胚中大肠杆菌分离率高达50%。 禽类的致病机理则是由于各种原因如法氏囊病、马立克病、新城疫、喉气管炎、鸡 瘟以及如药物、氨气（一方面损伤气管粘膜，另一方面氨气与空气中大肠杆菌数量呈正相关）都能损害呼吸道粘膜的完整性，抑 制呼吸道纤毛的摆动。同时该致病菌可以凭借自身的菌体粘着因 子与上皮细胞中的互补的受体以一种高度特异的“一钥一锁”或 诱导契合的方式结合，当这种结合方式一旦建立后，结合在粘膜 上的大肠杆菌不易被机体所清除，当这种结合后的大肠杆菌进入 呼吸道深部繁殖特别是进入肺部时极易进入血液形成菌血症，在 血液和组织的抵抗力较强时，仅限于局部感染如气囊炎等，另外 本菌在繁殖过程中形成的内毒素可以增强该菌对组织的侵袭力 临床主要特点是小鸡发生急性肠炎，产卵母鸡发生急性肠炎、输卵管炎或腹膜炎等。 病鸡表现精神不振，食欲下降或绝食，羽 毛粗乱，呆立或卧地不起，瞌睡，并伴有排白色或绿色水样粪便， 肛门周围羽毛被粪便污染；部分病鸡呼吸困难，表现为张口呼吸， 鼻分泌物增多[6]。随着病程的发展，病鸡精神更加沉郁，个别鸡 扇动翅膀，尖叫不安，有的因腿弱而卧地不起，少数鸡张口呼吸、 排稀粪或水样便，呈灰白色、黄色至黄绿色，最后衰竭死亡。感 染脐炎的雏鸡脐孔红肿，并常破溃后腹部胀大，呈红色或青紫色， 粪便黄出色、稀薄、腥臭，病雏萎顿、废食，出壳后几天内死亡。 个别鸡有神经症状，突然倒地死亡，死鸡一肢或两( 网:微生物（大肠杆菌）专题报告文献)肢向后挺伸，头颈后仰似角弓反张状。少数鸡耐过、但因食欲 不振、发育迟缓而消瘦。 病程在2—3d，有的没有表现出临床症状就突然死亡。病鸭精 神萎靡、食欲不振或废绝、羽毛松乱、喜独立、饮水量增加、脚 软扑地行走、不爱下水活动，下水后却无力气上岸，甚至死在水 里。病鸭严重下痢、排淡黄色、黑色或绿色的粪便，有的病鸭粪 便带有血丝，肛门周围的羽毛被粪便污染．关节肿胀，跛行，有 的病鸭有脱肛现象。发病后期，病鸭腹部膨大、下垂、整个身体 犹如企鹅，触摸有波动感，用针刺有淡黄色腹水流出，逐渐衰竭 死亡[7]。 新出壳的雏鸭发病后，质较弱，闭眼缩颈，腹围较大，常有下 痢，因败血症死亡。较大的雏鸭发病后，精神委靡，食欲减退， 隅立一旁，缩颈嗜眠，两眼和鼻孔处常附黏性分泌物，有的病鸭 排出灰绿色稀便，呼吸困难，常因败血症或体质衰竭、脱水死亡。 成年病鸭表现喜卧，不愿走动，站立时，可见腹围膨大下垂，呈 企鹅状，触诊腹部有液体波动感，穿刺有腹水流出。 母鹅感染后，急性型表现败血症，发病急，死亡快，食欲废绝，但渴欲增加，体温升高，比正常温度高出1～2。慢性型病程3～ 天，有时可长达10余天。母鹅群产蛋后不久即发病，部分鹅产 软皮蛋，继而产蛋减少。病鹅精神沉郁，食欲减退，不愿行走， 下水后在水面上漂浮，常离群落后，肛门周围羽毛沾有污秽发臭 的排泄物，混有黏性蛋白状物质及固体的蛋白或卵黄小凝快，病 鹅食欲废绝、消瘦、产蛋停止、失水、眼球下陷，最后衰竭死亡， 病程大约2～6 d，仅有少数病鹅能够自行康复[8]。 雏鹅特征性的症状是小鹅肿头症，一般先结膜发炎，眼肿流泪，有的上下眼睑粘连，严重者头部、眼睑、下颌部水肿，尤以下颌 部水肿明显，触之有波动感。多数很快死亡，有的经5～6 日死亡。 雏鹅除水肿症状外，肠黏膜出血，个别病雏可见气囊混浊，心包 膜增厚，心包液增多。 成年母鹅的特征性病变为卵黄性腹膜炎，腹腔内有少量淡黄色腥臭混浊的液体，常混有损坏的卵黄，各内脏表面覆盖有淡黄色 凝固的纤维性渗出物，肠系膜上有小出血点。卵巢变形萎缩，呈 灰色、褐色或酱色等。输卵管黏膜发炎，内有小出血点和淡黄色 纤维性渗出物沉着。鹅体消瘦，气管内有黄白色泡沫样渗出物。 肝质脆、淤血，表面有针尖大出血点。公鹅的病变仅限于外生殖 器部分，严重者布满绿豆大小坏死灶。 病鸽初期吃料少，喝水多，2－3天后不食，嗉囊积食胀大，体 瘦、衰竭，粪便稀如水样，有黄色、白色尿酸。精神沉郁，缩头 闭眼，食欲减少或停止，羽毛松乱，呆立，流泪，流涕，呼吸困 难，排黄白色或黄绿色稀粪，终因极度消瘦衰竭而死亡。 5.1主要病变 急性败血型主要病变是：纤维素性心包炎，心包积液混浊、增厚，更甚者纤维素渗出物与心包粘连；纤维素性肝周炎，肝 脏肿大、表面有纤维素性渗出物，严重时整个肝脏被一层纤维素 性薄膜包裹；纤维素性腹膜炎，腹腔有数量不等的腹水及纤维 素渗出物，或其渗出物充斥于腹腔各脏器间。 5.2生殖器官症状 卵黄性腹膜炎的病变，为输卵管伞部粘连、卵泡跌入腹腔引起广泛腹膜炎。卵巢炎、输卵管炎多见于产蛋母鸡输卵管充血、出 血。卵泡膜充血、卵泡变形、变色 (呈红褐色或黑褐色)，有的变 硬，卵黄变稀。公鸡睾丸膜充血、肿胀。 5.3其它器官病变 如全眼球炎(眼球感染后眼房水和角膜发生混浊，视网膜剥离，眼前房积脓，造成失明)、大肠杆菌性关节炎、关节滑膜炎、肠炎、 呼吸器官的炎症(胸腹气囊炎)，肝、盲肠、十二指肠和肠系膜有大 肠杆菌性肉芽肿结节，肠粘连不易分离，肝脏可见大小不一 对于家禽大肠杆菌病的诊断，在分离培养时还必须进行普通肉汤的培养和鉴别培养基培养且同时进行。如确定是致病性的大肠 杆菌，还必须进行致病性的回归试验。目前在许多国家建立了鸡 气管上皮细胞粘附间接 ELISA 方法, 用该法来判断大肠杆菌致病 性的强弱，对大肠杆菌病的监测有重要意义。 禽大肠杆菌病常缺乏特征性表现，可结合本病流行特点、临床症状和剖检病变综合分析，作出初步诊断。但其他病原微生物感 染也会出现类似的剖检变化，所以有条件的地方要以细菌学检查 为中心，与其它类似疾病进行鉴别，还必须考虑到有无混合感染。 通过病原分类，进行细菌分离培养和血清型鉴定确诊。关于大肠 杆菌的不同血清型问题，必要时要委托专门的检验机关进行鉴定 致病性大肠杆菌无处不在，无时不有。欲有效控制禽大肠杆菌病，必须从引起感染的各个方面进行考虑，改善饲养环境，减少 感染压力，进行综合防制。饲养环境的控制，主要有清粪与垫料 管理、做好禽舍通风换气、搞好带禽消毒等三大环节。还要从水 质、饲料加工、种蛋的消毒与管理、卵化过程的内外环境控制等 各环节进行综合防制。本病可经卵传递，种蛋必须来源于无大肠 杆菌病的健康禽场，种蛋和孵化设备要严格彻底消毒。 该病的发生还与外界的各种应激因素有关，预防时，平时要加强对禽群的饲养管理，逐步改善禽舍的通风条件，认真落实禽场 的兽医卫生防疫措施。种禽场应加强种蛋收集、存放和整个孵化 过程的卫生消毒管理。另外应搞好常见多发疾病的预防工作。禽 群发病后可用药物进行防治。近年来在防治本病的过程中发现， 大肠杆菌对药物极易产生抗药性，因此防治本病时，有条件的地 方应进行药敏试验选择敏感药物，或选用本场过去少用的药物进 行全群给药，能收到满意效果。早期投药可控制早期感染的病禽， 促使其痊愈，同时可防止新发病例的出现。对已患病、体内已造 成上述多种病理变化的病禽治疗效果极差。 动物微生物及免疫学(实践教学)开题报告 动物医学2009-1 联系方式： 1528352XXXX 导教师：XXX 2011-6-20 动物微生物及免疫学(实践教学)开题报告 novelapproach Escherichiacoli antibiotics（评估大肠杆菌对抗生素易感性的一种新方法） Escherichiacoli CVCC249 在不同抗生素浓度下的动态增长过程 的分析结果表明，不能获得理想的最终结果的原因是用 AST 能完全确定药物浓度和细菌数量之比以及药物浓度和作用时间的综合效应。基于一系列浓度梯度的庆大霉素处理一定时间细菌的 增长过程的分析，以及根据向前差分法，一种 AST 新方法被提了 出来。 1、AST（药敏试验）是临床微生物学实验室最重要的任务之一，它通常定性在MIC（最低抑制浓度）和MBC（最低杀菌浓度），这 是由不同的杀菌方法和纸片扩散确定的。从 AST 获得的参数通常 用来表明抗性反应或细菌对抗生素的敏感性，利用这些结果提供 合理用药指导。 2、然而，由于AST的结果容易受到许多不确定因素的影响，使 得耐药性和敏感性之间的断点变得相当难以区分。许多临床研究 组织为 AST 的标准化方法作了巨大的努力。美国临床试验标准研 究所1971 年提出了CLSI 的标准化方法，还有后来英国抗菌化疗协 会提出BSAC 法，欧洲药敏测试委员会提出EUCAST 法等。尽管标 准在逐渐完善和提高，但前面的路还着实很远。 法。根据Fibonacci序列分析，他们用细菌浊度的RC 作为目标函 数，提出了 AST 新方法。这个方法有望发展成为药效学的一种常 用方法。 1、从鸡中分离出来的致病性大肠杆菌E.coli CVCC249 coli25922 1、用增长序列浊度的RC值描述抗生素的抑制率 细菌细胞分裂的发生是一个随机过程，在任何时候细胞分裂都会有一定的比例。一定程度上符合Fibonacci 序列。但是，浊度仅 仅反映细胞的总数，不能区分分裂和休眠细胞，而一般把细胞分 裂用于目标函数。一般情况下，休眠细胞可以通过浊度的净增加 值予以消除。RC 的“无药”起点和“有药”终点可用来确定药物 的抑制率。 2、用CFU和浊度的方法测定细菌的生长情况 5L接种菌株E. coli CVCC249，于10L 发酵罐，37C 条件下培养， 采样时间间隔为1h。 等高线图是非线性回归基础上的非建模分析方法，可用来进行两个变量间的复杂分析。半乳糖苷酶可用来反映浓度和作用时间 对酶催化的综合效应。 4、用AUC描述“用药”和“不用药”条件下细菌的增殖 一个单点的吸收光谱曲线可以反映一个系统所有因素的影响，然而波长间隔可以在很大 程度上影响实验误差，而波长间隔越大，误差越小。因此，若用AUC 法对最初和最终的波长下的吸光度进行积分，则得到的结果 误差会较小。相比经典的吸光度方法，AUC 法更准确，可用它来 减少只选择单一波长为目标函数所造成的误差。 5、用Savitzky-Golay样条估计平滑观察值 RC对误差非常敏感，在某些情况下递归曲线反映会类似于瞬时 生长速率的现象，干扰统计分析。为了消除干扰，应该把数据平 滑一下。 1、限制性培养条件下的细菌种群的RC分析 （1）相同的增长过程中，CFU方法获得的生长曲线显示出高斯 分布，而浊度的生长曲线显示潜伏期时间不少于20 小时的波兹曼 分布。 （2）浊度和CFU方法得到的结果非常接近，RC 振荡在0.95 1.2之间。可以预见，抗生素抑制下细菌的RC 值将小于1.0。 （3）在浊度中RC 净增加值可用于消除休眠细胞的影响，其结 果CFU 方法相当，但不受接种和不同生长时期影响。 2、净RC值估计庆大霉素对Escherichia coli CVCC249 的抑制率 （1）即使接种量不同，RC值的动态变化仍然相似。 （2）当浊度的AUC 用来进行定量表征，抑制动态过程与细胞 的抑制常数1107 和3.5105 CFU 接种量有显著不同。但当RC 曲线的 AUC 用于定量表征时，它们将彼此相同。这表明净 RC （3）单因素分析得到的结果：药物的影响被局限在某一时刻单一的浓度的影响，不能显示浓度和时间的综合效应。 3、抗生素的浓度和作用时间对Escherichiacoli CVCC249 抑制率 的综合效应 mL时，超过10 小时没有 抑制效果。然而，当浓度大于2.0μ mL时，抑制率随着浓度的 增加而增加。若要获得60％的抑制率，需要超过4.0μ 度和超过20小时的作用时间。 （2）当接种量为3.5105CFU时，庆大霉素浓度和作用时间对 抑制率的影响是相同的。 （3）一种药物对一种确定菌株的效果依靠作用时间或浓度，取决于这两个变量的综合影响。 （4）高浓度庆大霉素抑制率的等高线图表示，为了获得100％的抑制效果，需要15μ mL庆大霉素处理10 小时。 （5）从药物浓度和作用时间的不同组合可以得到同一抑制率，而这不能由CLSI 方法得到。 小结：浊度的净增值用于消除休眠细 胞的影响，然后用细菌浊度的净RC 值变化表示抗生素对细菌的分 裂的影响。最后，用等高线图显示药物浓度和作用时间的综合效 1、科学是一个不断发展的过程。在这个过程中，有成功，有失败，有对前人假说的否定，也有对前人学说的验证，还有对已有 技术的革新。这要求研究者有一定的独立思考能力和批判精神， 敢于发现，敢于质疑，敢于探索，敢于将成果公诸于众。 2、我们做科研时要注意选题的重要性。重点选择人类目前急需解决的生产生活面临的难题。 如这篇文章讲的是临床微生物学的 一项研究，目的在于更好地提供抗生素的合理用药指南。而如何 合理应用抗生素就是摆在当今人类面前的一大问题。 3、学科之间的交叉性。本文用数学分析的方法运用于细菌实验，将微生物学和数学很好地结合在了一起。因此，学会根据不同学 科的内容和特点，选取研究方向，对研究大有裨益。这也是当代 大学生应当培养的专业素质和能力。请联系本站代写专题报告