课题名称：维药行气通络精油工艺开发及其临床研究
（一）立项依据与研究内容（建议8000字以下）：
1. 项目的立项依据（研究意义、国内外研究现状及发展动态分析，需结合科学研究发展趋势来论述科学意义；或结合国民经济和社会发展中迫切需要解决的关键科技问题来论述其应用前景。附主要参考文献目录）；
植物精油是存在于植物中的一类具有生物活性的成分，可随水蒸汽蒸馏出来，一般具有一定的芳香气味且在常温下具有挥发性，因此又称挥发油、芳香精油。主要以植物的花、叶、根、树皮、果实、种子、树脂等为原料以水蒸气蒸馏、压榨方式或溶劑萃取法来提炼出来的天然化合物[1]。精油含量较丰富的植物有芸香科、樟科、兰科、伞形花科、姜科、菊科、龙脑香科、唇形科、胡椒科等。植物精油中含有的萜类、醇类和酚类等主要化学物质使大多数的植物精油有着独特的药理活性和药用价值，是许多中草药主要有效成分之一。已知植物精油有驱风、活血、镇痛、抗肿瘤等多方面的药理作用。丁香罗勒油、八角回香油、广藿香油、肉桂油、桉油、莪术油、薄荷油等均已收载于中国药典一部[2]。随着现代研究的深入，植物精油的体外药理活性更广泛，应用前景更广阔。
1、具有抗菌消炎的作用
精油在抗菌消炎方面本身就有一定的优势，且经过近几年的研究发现出一些在抗菌消炎方面有杰出表现的精油。有文献报道：在临床研究治疗头部脂溢性皮炎中香柏酊具有较强的抗炎作用[5]；李唐萍等学者利用柠檬精油对牙周致病菌的体外抑制作用作了研究，发现柠檬精油对牙周致病菌Pg、Fn、Aa、Pi具有抑制活性，低浓度对机体相对安全[6]。现有医院口腔科就有医生经常将柠檬精油稀释在水中给患者漱口，医治口腔溃疡。在日常抗菌、消炎的运用方面桉叶精油[7]、艳山姜叶片精油[8]、红葱头精油[9]、丁香精油[10]等也有较好表现。
2、镇静安神、抗焦虑作用
在医学上运用精油去治疗和舒缓情绪的疗法称为芳香疗法，主要是利用某些精油具有镇静催眠成分，可显著减少动物自主活动，抗焦虑，缩短睡眠潜伏期，延长睡眠时间。钟钰[11]等利用GC-MS分析出复方安神精油主要化学成分与入脑主要化学成分中含有多种具有神经中枢镇静催眠、抗焦虑、抗抑郁作用的化学成分，并通过小鼠自主活动测试实验得到确证。香蜂草中的迷迭香酸能提高脑内的GABA浓度，起到抗焦虑、镇静作用[12]，也有研究表明苦水玫瑰精油和大马士革玫瑰精油均具有显著的镇静催眠效果[13]。佩兰精油、远志精油、薰衣草精油[14-15]也对神经系统有非常好的镇静安神、催眠、抗焦虑的药理作用。
3、抗氧化，清除自由基作用
抗氧化，清除自由基是植物精油普遍存在的一种活性，植物精油具有抗氧化活性是各种抗氧化成分的综合结果[16-17]，孙崇鲁[18]等对香樟叶用60%乙醇提取香樟中黄酮类化合物，采用烘箱贮存法测定了其对猪肉的抗氧化作用，也对香樟叶的水、石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇提取物清除DPPH自由基进行了研究，得出香樟精油有清除自由基的作用。罗世惠[19]等对樟属的香樟、天竺桂、蜀桂、香桂4种植物叶片精油清除DPPH自由基清除能力作了研究，结果显示这4种植物精油都具有一定的抗氧化和清除DPPH自由基的药理活性。
4、愉悦情志，美肤养颜作用
人的脸上有着很多的穴位，在面部护理时可以搭配精油进行按摩适当刺激这些穴位，可达到一定程度舒络活经、畅通气血、愉悦心情的作用，无论是面部护理还是身体护理，中医穴位搭配芳香精油都可达到理想的放松心情效果，中医芳香美容在很多芳香疗法会所中，被广泛使用并得到大众认可[20]。日常生活中，我们经常使用含有天然VitC、VitE的护肤精油，因为这些成份对于皮肤有平衡油脂分泌、抗氧化、抑制黑色素，清除自由基，削除皱纹有较好的功效。植物精油的舒经活络、畅通气血、皮肤保湿等药理活性加上精油本身怡人芳香，使得芳香疗法在SPA中成为新宠。所以妆品行业里经常使用及添加柠檬精油[21]和玫瑰精油[22]。
国内外发展现状及趋势
中国地大物薄，植物资源丰富，含精油的物种很多，其中所含成分也各不相同。对精油的药理研究更深入，就会发现更加具有独特药用价值的天然化合物。因此，对植物精油的研究仍是国内外植物开发热点之一。维吾尔地区是传统中草药的主产地，精油植物资源丰富。维吾尔医药是中华民族的瑰宝，有着丰富的文化底蕴。如今，中医维医药现代化发展离不开传统医学基础上的创新，只有源源不断注入新元素，才能使维医药发展经久不衰、焕发活力。维医外治虽是迄今所知治疗疾病最早的方法，但事实是维医药外治发展较为落后：维医讲究《内外兼治》，经皮给药是除口服以外最常用的给药途径，虽外用剂型多样，疗效确切，但吸收受限，作用机制模糊；虽成分提取方法多样，但多为粗提，缺乏有效成分的精制。与内服药相比，外用研究和临床应用整体较少、层次较低。
维药行气通络油是多种中药和维药材组成，应用比较广泛，油剂外形颜，味香，吸收性良好的药油之一。主要成分的红花、丁香、乳香等成分等药香味，不烦人嗅觉，容易接受。此外，涂法、敷法、擦法等可通过接触皮肤局部微吸收发挥局部治疗作用。本配方药材橄榄油调成为油，外部使用，有直接的治疗作用。微循环、皮肤微刺激，给药方便。如果用药过程中，发生不良反应，可及时终止给药、方便清除残余药物的优势。由此可见，维药行气通络油可满足维医药临床外用需求，有利于推动和顺应维医外治维药，创新性发展和系统性应用的潮流。
参考文献
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2. 项目的研究内容、研究目标，以及拟解决的关键科学问题（此部分为重点阐述内容）；
研究内容、研究目标
1、维药行气通络精油提取物制备工艺开发；2、维药行气通络精油治疗类风湿关节炎临床研究。选取60例类风湿关节炎患者为研究对象，随机分为观察组和对照组各30例。对照组进行常规针刺治疗，观察组采用维药行气通络精油进行治疗。对比两组临床疗效。验证维药行气通络精油对改善类风湿关节炎患者临床症状作用，是否能有效改善并提高患者生活质量。
拟解决的关键科学问题
“维药”是指新疆维吾尔自治区境内所产的道地药材，也包括维吾尔族聚居地区维医使用的药物。维药行气通络精油是一种从精选新疆维吾尔自治区药材中提取的透明的液体，本课题研究水蒸气蒸馏法提取维药功效成分——维药行气通络精油最有效方法的确定，以形成一定的技术路线，能够提高维药产品的附加值和利用率。
类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis，RA）是一种以慢性侵噬机体多关节为主要临床表现的全身性自身免疫性疾病。该病是一难治性、致畸性自身免疫性疾病，常反复发作，治疗周期相对较长。病情严重者会引起关节畸形改变，甚至可以累及心脏，严重影响患者生活质量。课题组选用维药行气通络精油治疗类风湿关节炎患者，探讨其临床效果。
3. 拟采取的研究方案及可行性分析（包括研究方法、技术路线、实验手段、关键技术等说明）；
研究方案
1 一般资料
选取骨伤科门诊治疗的60例类风湿关节炎患者。将入选的60例患者按治疗方法不同分为两组，对照组30例，治疗组30例。两组性别、年龄、病程等差异不具有统计学意义（P>0.05），具有可比性。
2 诊断标准
参照中华中医药学会《类风湿关节炎中医诊疗指南》（以下简称“指南”）中采用1987年美国风湿病学会（ACR）修订的类风湿性关节炎的诊断标准。诊断标准如下：①晨僵至少1 h，持续至少6周；②3个以上关节肿，持续）6周；③腕、掌指关节或近端指间关节肿，持续≥6周；④对称性关节肿，持续≥6周；⑤手X线改变；⑥皮下结节；⑦类分湿因子阳性。符合以上7条中≥4条标准即可确诊为RA。
3 纳入标准
①符合《指南》中对RA诊断标准；②年龄20～60岁；③治疗过程中不同时使用其他治疗方法的患者；④未出现重大器质性病变及严重并发症的患者；⑤自愿接受本方案治疗并签署知情同意书的患者。
4 排除标准
①妊娠或哺乳期患者；②心、肝、肾功能不全者，或患有精神病患者；③合并强直性脊柱炎、急性痛风、骨关节炎等疾病的患者；④已出现骨破坏等严重并发症的晚期类风湿关节炎患者；⑤拒绝填写知情同意书患者。
5 治疗方法
5.1 两组取穴
局部取穴：根据疼痛部位以及侵犯的关节选取相应的穴位，如肩关节痛，取肩前、三角肌，阿是穴；肘关节痛取曲泽、尺泽、手三里；腕关节痛取阳溪、合谷、阳池；掌指关节痛取八邪；髋关节取环跳、风市，膝关节取膝眼、阳陵泉、阴陵泉；踝关节取解溪、昆仑、丘墟、申脉、照海，治疗时根据患者病变部位和中医辨证不同，分别选取相对应的3～5个穴位，隔日1次。连续治疗1个月后观察治疗效果。
5.2 对照组
常规针刺治疗：采用直径0.25 mm、长度20～40 mm的一, 次性使用無菌针灸针，穴位采用常规针刺法，以平补平泻手法为主，隔日1次，每次需留针30 min。
5.3 治疗组
维药行气通络精油治疗。维药行气通络精油提取物制备：精选维药行气通络精油药材根茎25 kg，先完成清洗、粉碎，使用挥发油提取仪进行水蒸气蒸馏，收集液用乙醚萃提3次，然后混合乙醚提取液，低温去除乙醚，最后无水硫酸钠干燥，得油状物约5 mL装瓶备用。操作方法：上述萃取的维药行气通络精油油状提取物5 mL。针具采用直径0.35 mm、长度40 mm一次性使用无菌针灸针数枚，酒精灯1盏。操作时先把无菌针灸针的针体在大黄，桃仁，红花，当归，川芎，白芍，丁香，乳香药油提取液中浸润，然后手持针柄将浸润药油的针体在酒精灯火焰上烧灼，至针体稍红时取下，迅速刺入所选的穴位。每次需留针30 min，隔日施术1次。
6 观察指标
连续治疗1个月后，观察治疗前、后患者的关节压痛、晨僵时间、关节肿胀等临床症状的改善及临床疗效。
7 疗效判定
参照《中药新药临床研究指导原则》制订的标准。临床痊愈：临床症状及体征改善75%以上（含75%），关节疼痛肿胀症状消失，无晨僵、压痛；显效：临床症状及体征改善50%～75%（含50%），关节疼痛肿胀明显减轻，晨僵不明显，略有压痛感；有效：临床症状及体征改善30%～50%（含30%），关节肿胀仍存在，疼痛稍有减轻，有晨僵和压痛感；无效：临床症状及体征改善小于30%：临床症状及体征较治疗前没有任何改善，甚或加重。总有效率=痊愈率+显效率+有效率。
8 统计学处理
采用SPSS16.0统计学软件进行分析，计数资料用百分率（%）表示，采用X2检验，计量资料采用t检验，P<0.05表示差异具有统计学意义。
可行性分析
精化油入药离不开实验室安全性与有效性的研究。精油的提取工艺不同芳香疗法初始时期，而是形成了一套相对完整的提取、纯化、富集和加工工艺，并可长期储存。比较常用的提取方法有水蒸气蒸馏法、超临界二氧化碳萃取法、微波辅助提取法、超声波辅助提取法等。含量分析与检测方法有气相色谱-质谱（GC-MS )法、气相色谱-氢火焰离子（GC-FID )法、气相色谱-飞行时间质谱法、超高效液相色谱（UPLC）及液-质联用技术（LC-MS /MS）等。我们课题团队联系有条件的高校实验室或研究单位，设计和采用最佳合适的方案及方法，初步测定本配方药的油剂活性成分，并作工艺进一步优化。
天然植物精油具有来源广泛和毒性小的特点，是一个富有潜力的生物资源，随着各种分离和检测技术的不断进步，植物精油的组分、结构和功能日趋明朗化，它必将会在医药方面具有更大的应用和开发空间。此方油，极渗透皮肤，有比较强的渗透，通过皮肤能迅速的吸引，并达到局部组织起到作用。中医学认为，人体经络系统包括十二经脉、任脉、督脉、经络、经筋、皮肤、穴位等，中医外治内涵从外治内和外治内的概括。经络在身体面，属于脏腑，在身体外面，络于肢节，通连内外，沟通上下，使人体面的脏腑和外面部分组织器官连接成为一个有整体。所以，使用的某一种外用药，也起到全身作用。
预期成果
1、20XX年XX月——20XX年XX月，维药行气通络精油工艺理论与实践的论证，调查报告，XXX负责。
2、20XX年XX月——20XX年XX月，维药行气通络精油有效提取工艺模式研究，结题报告，XXX负责。
3、20XX年XX月——20XX年XX月，实施维药行气通络精油有效临床病例治疗，病例治疗结果收集及分析，论文，XXX负责。
应用前景分析，效益分析
随着我国综合实力的不断提升，人们生活水平也在不断进步，越来越多的人开始追求一种小众的享受方式，比如用植物精油为媒介进行推拿治疗或者保健美容。中药精油的研发在行业发展过程中存在不少问题。中药外治虽是迄今所知治疗疾病最早的方法，但事实是中药外治发展较为落后：虽剂型多样，但吸收受限；虽临床疗效确切，但作用机制模糊；虽成分提取方法多样，但多为粗提，缺乏有效成分的精制……与内服相比，外用研究和临床应用整体较少、层次较低。
精油产业是一项新兴产业，不仅满足了人们崇尚自然、追求健康的需要，而且具有很好的经济效益和社会效益。统计资料表明，全球发现的芳香植物有3600多种，但被开发和利用的芳香植物只有400余种，经常使用的芳香植物仅为200种～300种，用于精油生产的芳香植物仅有160种左右。其市场容量为150亿欧元，并以每年5％的速度增长，精油的年需求量约为10亿千克，而目前全世界生产量仅30多万吨，因此具有广阔的市场前景。
4. 本项目的特色与创新之处；
类风湿关节炎是一种变态反应性，以慢性、对称性、多关节非感染性炎症为主要特征的全身性自身免疫性疾病。我国作为RA的多发国家之一，临床医学在治疗RA时没有特别行之有效的方法，并且传统西医治疗方法只能是对症治疗，虽然可以帮助患者改善临床痛苦症状，但无法达到治本目的。维医将该病称为“列钢风”，认为该病缘于素体本虚，或感受风、寒、湿等外在邪毒，致使体内盈亏失衡、阴阳失调而发病。油针疗法是根据维医药筋脉学说，辨别疾病的盈亏寒热，通过针具对人体体表一定部位或穴位的刺激，以及热量和药物对体表皮肤、穴位的渗透作用，以疏通筋脉、筋经，调整气血脏腑平衡，使机体功能和合，进而达到治愈疾病的目的。大黄，桃仁，红花，当归，川芎，白芍，丁香，乳香是维族地区特色药材，也是维族人民的常用药，称其为地钻。该药性味甘，微涩，平，具有祛风除湿、舒筋活络、消炎止痛、祛风利湿等功效，已被广泛用于治疗风湿痹痛等疾病。大黄，桃仁，红花，当归，川芎，白芍，丁香，乳香具有一定镇痛、抗炎作用。
运用维药行气通络精油治疗类风湿关节炎能明显减少患者痛苦，有效缓解RA患者炎症反应、消除肿胀，从而提高患者生存质量，同时维医油针治疗操作简单、疗效可靠，值得在临床上推广应用。但是，限于目前科研水平及试验条件制约，尚未对大黄，桃仁，红花，当归，川芎，白芍，丁香，乳香药油药物毒理作用及临床不良反应进行深入研究，这将是下一步科研工作的重点。
（二）研究基础与工作条件
1. 研究基础（与本项目相关的研究工作积累和已取得的研究工作成绩）；
陈一等采用蔓性大黄，桃仁，红花，当归，川芎，白芍，丁香，乳香乙醇提取物对小鼠进行抗“扭体反应”试验及热板试验，结果表明：大黄，桃仁，红花，当归，川芎，白芍，丁香，乳香乙醇提取物能够显著抑制小鼠醋酸性“扭体反应”、显著提高热板试验中小鼠的痛阈，提示蔓性大黄，桃仁，红花，当归，川芎，白芍，丁香，乳香具有一定的镇痛作用；试验又采用蔓性大黄，桃仁，红花，当归，川芎，白芍，丁香，乳香乙醇提取物对小鼠足肿胀及小鼠巴豆油耳部水肿的影响来证明其抗炎作用，结果表明：蔓性大黄，桃仁，红花，当归，川芎，白芍，丁香，乳香乙醇提取物能够显著抑制正常大鼠角叉菜胶性和蛋清性足肿胀、显著抑制巴豆油性小鼠耳部水肿、抑制大鼠白细胞游走，提示大黄，桃仁，红花，当归，川芎，白芍，丁香，乳香蔓性具有一定抗炎作用。
目前已知有509种中药材含挥发油，占药典15%，广泛应用于医药原料、食品和化妆品领域。掌握性味归经，根据辩证，选择香药或精油配伍使用，辩证用香，提高临床疗效。目前，精华油行内动态，提取工艺或浓缩精油比较成熟，中药精油的实验室研究也相当充分，为中药配方精油成为中药人药新形式提供了实验支撑。疗效确切的中药配方精油研发，均有很好的研究价值。此方药疗效比较显著，作用广泛。主要功效有驱风通络，活血化瘀，通络补气，止痛止痒，皮肤润滑等作用。临床用于风湿关节炎，肩周炎，筋膜损伤，跌打肿痛，皮肤干燥，瘙痒等。使用的时候，按照病人的疾病为选择涂抹油的部位，如背、腰、胸、腹部、大腿、小腿、手臂、手、脚等部位即可。
通过单因素试验比较，维药粉粉碎程度对维药行气通络精油提取率的影响结果确定为30目筛为最合适的维药粉颗粒大小，物料比对维药行气通络精油提取率的影响结果确定为蒸馏水与维药粉的最佳比值为15：1，浸泡时间对维药行气通络精油提取率的影响结果确定为蒸馏水浸泡维药粉的最佳时间为3h，蒸馏时间对维药行气通络精油提取率的影响结果确定为最合适的蒸馏时间为4h，如蒸馏时间太长，将导致维药行气通络精油分解，烘干温度对维药行气通络精油提取率的影响结果确定为最佳烘干温度为80℃，温度较高时，维药行气通络精油随着蒸汽容易蒸发到空气中。在单因素的而基础上，进行了正交试验，将正交试验和单因素试验综合比较分析，最终得出水蒸气蒸馏法提取维药行气通络精油最佳工艺为：蒸馏4h，浸泡3h，烘干温度80℃，物料比1：15。
2. 工作条件（包括已具备的实验条件，尚缺少的实验条件和拟解决的途径，包括利用国家实验室、国家重点实验室和部门重点实验室等研究基地的计划与落实情况）；
3. 其他。
