陆国能 蓝晟恺 胡春江 黄柳 张裕资

来宾市中医医院麻醉科，广西 来宾 546100

课题资助：广西壮族自治区卫生健康委员会自筹经费科研课题（Z20190497）

摘要：目的 探讨银杏叶提取物注射液预防肢体缺血-再灌注（Ischemia-reperfusion，IR）患者肺损伤的效果。方法 选取96例择期单侧下肢手术患者并随机分为对照组和观察组，每组48例。两组均行椎管-硬膜外联合麻醉，观察组于止血带充气前15min静滴银杏叶提取物注射液，对照组给予等量生理盐水。分别于止血带充气前（T₁）、松开止血带10min（T₂）、松开止血带30min（T₃）、松开止血带60min（T₄）记录氧合指数（OI）、肺泡-动脉血氧分压差（P_A-aO₂）、呼吸指数（RI）；采集动脉血样，测定血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度。结果  与T₁时相比较，两组T₂~T₄时OI、RI显著降低（P＜0.05），P_A-aO₂显著增高（P＜0.05），血清SOD水平显著降低（P＜0.05），血清MDA、IL-6、IL-8、TNF-α水平显著增高（P＜0.05）。与对照组相比较，观察组T₂~T₄时OI显著增高，P_A-aO₂、RI显著降低，血清SOD水平显著增高（P＜0.05），血清MDA、IL-6、IL-8、TNF-α水平显著降低（P＜0.05）。结论 银杏叶提取物注射液对肢体IR所致肺损伤具有明确的保护效应，其机制可能与改善机体氧化应激和炎症级联反应有关。

关键词：银杏叶提取物注射液；缺血-再灌注；肺损伤；下肢

Effect of Ginkgo biloba extract injection on lung injury caused by extremity ischemia-reperfusion

Abstract Objective To evaluate the effect of of Ginkgo biloba extract injection on lung injury caused by extremity ischemia-reperfusion（IR）. Methods 96 patients with unilateral lower extremity surgery, were divided to observation group and control group, 48 case with each group. All patients were treated by combined spinal epidural anaesthesia. The observation group was injected with Ginkgo biloba extract injection 15min before apply tourniquet, and the control group was injected with equal volume of normal saline instead. Before tourniquet inflation（T₁）and 10min（T₂）, 30min（T₃）, 60min（T₄）after tourniquet deflation, the oxygenation index（OI）, alveolar-arterial oxygen partial pressure difference（P_A-aO₂） and respiratory index（RI）were recorded. And the same time, level of serum superoxide dismutase（SOD）, malondialdehyde（MDA）, interleukin-6（IL-6）, interleukin-8（IL-8）and tumor necrosis factor-α（TNF-α）were detected. Results Compared with T₁, the OI and RI were significantly decreased（P＜0.05），P_A-aO₂ was significantly increased（P＜0.05），serum SOD level was significantly decreased（P＜0.05）, and serum MDA, IL-6, IL-8 and TNF-α level were significantly increased at T₂~T₄ in two groups（P＜0.05）. Compared with control group, the OI was significantly increased（P＜0.05）, P_A-aO₂ and RI were significantly decreased（P＜0.05）, serum SOD level was significantly increased（P＜0.05）, and serum MDA, IL-6, IL-8 and TNF-α level were significantly decreased（P＜0.05）at T₂~T₄ in observation group（P＜0.05）.Conclusion Ginkgo biloba extract injection can effectively reduce the lung injury caused by limb IR, the mechanism may be related to the improvement of oxidative stress and inflammatory cascade.

Keyword: Ginkgo biloba extract injection; Ischemia-reperfusion; Lung injury; Lower extremity

下肢手术术中应用止血带可减少术野出血，有利于手术操作，但也易导致肢体缺血-再灌注（Ischemia-reperfusion，IR）损伤，继而诱发远隔器官功能障碍^[1]。肺是下肢IR最常累及的器官之一，极易发生急性肺损伤，甚至引起急性呼吸窘迫综合征^[2]。目前认为，肢体IR过程中可产生大量氧自由基和炎性因子，诱发机体氧化应激和炎症级联反应，导致细胞结构和功能障碍，而这也是其造成远隔器官的损伤的主要机制^[3]。银杏叶提取物注射液以银杏黄铜及萜烯内脂为主要成分，已被证实具有抗炎和抗氧化的双重作用，但其对肢体IR患者肺损伤的影响尚未明确^[4,5]。本研究旨在探讨银杏叶提取物注射液对肢体IR患者肺损伤的保护作用，并从调控机体氧化应激和炎症反应分析其作用机制。

1 资料与方法

1.1 一般资料  选取2019年1月至2020年8月我院院收治的96例于腰-硬联合麻醉下行单侧下肢手术患者为研究对象，其中男性53例、女性43例，年龄20~60岁，BMI 18~28kg/m²，ASA I级45例、II级51例。纳入标准：①年龄18~60岁；②术中止血带使用时间60~90min；③择期手术；④ASA I~II级。排除标准：①凝血功能异常；②麻醉禁忌症；③合并严重呼吸系统疾病、糖尿病、高血压；④下肢静脉血栓或肺栓塞病史；⑤术前2周内服用氧化剂或抗氧化剂。按随机数字表法将入组患者分为对照组和观察组，每组48例。两组一般资料比较无统计学差异（P＞0.05），具有可比性，见表1。

表1 两组一般资料比较

1.2 方法  患者入室后建立静脉通道，并给予腰-硬联合麻醉，于L_3~4椎间隙进行穿刺，0.75％布比卡因（上海禾丰制药有限公司 规格：5ml/37.5mg 批号：73180903）1.5 mL，回抽脑脊液0.5 ml混合后注入，调节麻醉平面至T₁₀~S₁。1%利多卡因（遂成药业股份有限公司 规格：5ml/0.1g 批号：31911111）和0.25％布比卡因混合液备用，根据术中情况适量追加。于患者大腿中上1/3处上气压止血带，压力设置为300mmHg。观察组于止血带充气前15min静脉滴注银杏叶提取物注射液（悦康药业集团有限公司 规格：5ml/17.5mg 批号：19890124）1ml/kg，对照组给予等量生理盐水。

1.3 观察指标  

1.3.1 肺功能指标  分别于止血带充气前（T₁）、松开止血带10min（T₂）、松开止血带30min（T₃）、松开止血带60min（T₄），采集患者动脉血样，行血气分析，记录动脉血氧分压（PaO₂）和二氧化碳分压（PaCO₂）；按公式计算氧合指数（OI）、肺泡-动脉血氧分压差（P_A-aO₂）、呼吸指数（RI），OI=PaO₂/FiO₂；P_A-aO₂=[大气压（PB）-饱和水蒸气压（PH₂O）]×FiO₂－PaCO₂/呼吸商（R）－PaO₂；RI=P_A-aO₂/PaO₂。

1.3.2 氧化应激指标  取上述各时点血样并分离血清，采用ELISA法检测血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平。

1.3.3 炎症指标指标  取上述各时点血样并分离血清，采用ELISA法检测血清中白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。

1.4 统计学处理  SPSS26.0分析数据，正态分布计量资料以均数±标准差（）表示，采用单因素方差分析；计数资料以百分比表示，采用χ²检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 肺功能  与T₁时相比较，两组T₂、T₃及T₄时OI、RI显著降低（P＜0.05），P_A-aO₂显著增高（P＜0.05）。T₁时，两组OI、P_A-aO₂、RI比较无统计学差异（P＞0.05）；T₂~T₄时，观察组OI显著高于对照组（P＜0.05），P_A-aO₂、RI显著低于对照组（P＜0.05），见表2。

表2 两组各时点肺功能指标比较（）

注：与T₁时比较，^aP＜0.05；与对照组比较，^bP＜0.05

2.2 氧化应激  与T₁时相比较，两组T₂、T₃及T₄时SOD水平显著降低（P＜0.05），MDA水平显著增高（P＜0.05）。T₁时，两组SOD、MDA水平比较无统计学差异（P＞0.05）；T₂~T₄时，观察组SOD水平显著高于对照组（P＜0.05），MDA水平显著低于对照组（P＜0.05），见表3。

表3 两组各时点血清MDA及SOD水平比较（）

注：与T₁时比较，^aP＜0.05；与对照组比较，^bP＜0.05

2.3 炎症因子  与T₁时相比较，两组T₂、T₃及T₄时IL-6、IL-8、TNF-α水平显著增高（P＜0.05）。T₁时，两组IL-6、IL-8、TNF-α水平比较无统计学差异（P＞0.05）；T₂~T₄时，观察组IL-6、IL-8、TNF-α水平显著低于对照组（P＜0.05），见表4。

表4 两组各时点血清IL-6、IL-8、TNF-α水平比较（）

注：与T₁时比较，^aP＜0.05；与对照组比较，^bP＜0.05

3 讨论

由于肺脏血运丰富，故肢体IR极易对其造成功能性和器质性的双重损伤。OI是评价肺内气体交换和氧合情况的重要指标，正常值为400~500mmHg，当发生肺功能障碍或肺通气/血流比值异常时该数值下降明显^[6]。P_A-aO₂是判断肺换气功能正常与否的主要依据，其数值升高往往提示肺内分流或弥散异常^[7]。RI可客观反应肺弥散功能，该数值越高则代表肺弥散功能越差^[8]。本研究结果显示，与T₁时相比较，两组T₂、T₃及T₄时OI、RI显著降低（P＜0.05），P_A-aO₂显著增高（P＜0.05），与既往报道一致^[9]。提示肢体IR可导致患者发生不同程度的肺功能损伤。银杏叶提取物注射液具有改善微循环和保护血管内皮的功效，被广泛应用于组织器官IR损伤的防治。刘子宸等^[10]利用动物研究证实，银杏叶提取物注射液对脂多糖所致的大鼠急性肺损伤具有明确的保护作用。本研究通过进一步对比两组肺功能指标差异发现，观察组T₂~T₄时OI较对照组显著增高（P＜0.05），同时P_A-aO₂、RI较对照组显著降低（P＜0.05）。这表明，银杏叶提取物注射液可有效减轻肢体IR所致的肺功能损伤。

体内氧化/抗氧化失衡所导致的氧化应激反应是诱发肺损伤的重要机制。肢体IR所产生的大量氧自由基可经血液循环迁移至肺脏，造成肺毛细血管内皮细胞损伤，使得肺毛细血管完整性遭到破坏，血管通透性增加，进而引起肺水肿及换气功能障碍^[11]。作为内源性氧自由基清除剂，SOD活性可反映体内抗氧化能力的高低^[12]。MDA是脂质过氧化反应的主要代谢产物，是浓度是评价体内脂质过氧化程度的重要指标^[13]。陆斌等^[14]研究显示，肢体IR患者大多存在氧化/抗氧化失衡现象，主要表现为SOD活性降低及MDA浓度增高，与本研究结论相似。而相较于对照组，观察组T₂、T₃及T₄时SOD显著增高（P＜0.05），同时MDA显著降低（P＜0.05）。说明银杏叶提取物注射液可增强机体抗氧化能力，并抑制氧自由基生成，从而拮抗肢体IR所致的氧化应激反应。

炎症级联反应与肺损伤的发生发展密切相关。在肢体IR模型大鼠肺组织中，可见大量炎性细胞浸润，并伴有肺泡间隔增厚、肺泡间质充血水肿等病理表现^[15]。IL-6、IL-8及TNF-α均为公认的炎症相关因子。其中，IL-6可诱发中性粒细胞大量释放髓过氧化物酶及弹性蛋白酶损伤肺组织；IL-8可促使肺组织中性粒细胞迁移、粘附及浸润，加剧肺组织炎症反应；TNF-α由活化的单核巨噬细胞分泌，是炎症反应的重要启动因子，并可诱发包括IL-8在内的多种炎性因子释放，进而调控肺组织炎症反应过程^[16，17]。本研究结果显示，两组T₂、T₃及T₄时IL-6、IL-8、TNF-α水平均较T₁显著增高（P＜0.05），但观察组IL-6、IL-8、TNF-α水平均较对照组显著降低（P＜0.05）。这一结果表明，银杏叶提取物注射液可有效抑制肢体IR引起的炎症反应。

综上所述，银杏叶提取物注射液对肢体IR所致肺损伤具有明确的保护效应，其机制可能与改善机体氧化应激和炎症级联反应有关。

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